细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。2、制备PEI-DNA混合物：以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管，一管将质粒DNA（总量2-8μg为佳）加入240μLHBS中，混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混匀后室温静置20-30min。将这420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％CO2的37℃温箱孵育。注：每次用100μM的PEI储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。3、培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基，继续培养，16h左右可以观测到报告基因的表达。PEI转染试剂是一种阳离子聚合物转染试剂。上海高质量PEI转染试剂
注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。更多Polysciences PEI转染试剂等相关产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！近期还有PEI试用装申请活动，可关注我们的公众号：Mine-bio上海高质量PEI转染试剂PEI转染试剂可以转染哪些细胞呢？
注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。更多PEI相关的产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！
对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情况下，DNA-PEI复合物仍能转染细胞，但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到宜转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX转染试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1.5~4μL体积线性PEIMAX转染试剂进行优化。更多产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！PEI转染试剂保存条件是什么？
上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务，以创新和为价值理念，通过自身研发团队，以及与国内外专业科研团队强强联合，不断创新，为生命科学和医药研发行业提供产品和服务。生物医学工程是综合应用生命科学与工程科学的原理和方法，从工程学角度在分子、细胞、组织、乃至整个人体系统多层次认识人体的结构、功能和其他生命现象，研究用于防病、治病、人体功能辅助及卫生保健的人工材料、制品、装置和系统技术的总称。也欢迎关注我们的公众号：Mine-bio，查看更多技术文章！PEI转染试剂是一种稳定的具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子。上海PEI转染试剂哪个品牌好
PEI转染试剂，高效助力基因转染研究，试用装轻松上手。上海高质量PEI转染试剂
产品简介：Transporter5转染试剂是一种非GMP等级的即用型线性聚乙烯亚胺（PEI转染试剂）溶液，由PEIMAX配置而成，采用0.1umPES无菌过滤器，完全消除支原体污染风险。Transporter5将DNA缩聚成带正电荷的复合物，这些复合物很容易通过内吞作用进入细胞，并且Transporter5-DNA复合物能很好地抵御溶酶体的降解作用，有效提高转染效率。适用于工艺开发、临床前和早期临床研究，可无缝过渡到MAXgeneGMP用于商业化生产。Transporter5转染试剂能高效地将DNA转染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆虫（SF9、SF21）等真核细胞系，可作用于大到135,000个核苷酸的质粒，所以较大的质粒也可以成功地转染。Transporter5可节省试剂准备时间，加快项目进度。经过严格的性能检测，确保品质，在新药研发过程中是一款快速、重复性好、可用于批量产的转染试剂。产品特点：非GMP，研究级PEI转染试剂溶液；高转染效率；无缝过渡到MAXgeneGMP；易放大，可预测产量；用于工艺开发，临床前和早期临床研究。请关注我们的公众号：Mine-bio上海高质量PEI转染试剂
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